在應用蛋白免疫印跡檢測EGFRvIII時，如何與野生型EGFR進行區分？？
EGFRvIII是一種EGFR的突變體，它在多種癌症中高度表達，包括膠質瘤和非小細胞肺癌。與野生型EGFR相比，EGFRvIII具有內部缺失的外顯子，導致其在細胞內穩定存在，並且具有持續的啟用狀態，這使得EGFRvIII成為一個重要的癌症治療靶點。
要區分EGFRvIII和野生型EGFR，可以採取以下策略：
1.抗體選擇：
選擇能夠特異性識別EGFRvIII的抗體。由於EGFRvIII具有內部缺失，因此其表位與野生型EGFR不同。因此，需要選擇能夠特異性識別EGFRvIII的抗體，而不與野生型EGFR結合的抗體。一種常用的抗體是L8A4，它能夠特異性地結合EGFRvIII。
2.細胞系選擇：
使用表達EGFRvIII的細胞系作為陽性對照。在進行蛋白免疫印跡實驗時，可以使用表達EGFRvIII的細胞系作為陽性對照，以確保檢測到EGFRvIII的存在。同時，還需要使用野生型EGFR表達的細胞系作為陰性對照，以區分EGFRvIII和野生型EGFR。
3.分子量分析：
EGFRvIII與野生型EGFR在分子量上存在差異。EGFRvIII由於內部缺失，其分子量較小於野生型EGFR。因此，在進行蛋白免疫印跡實驗時，可以透過分子量分析來區分EGFRvIII和野生型EGFR。透過比較EGFRvIII和野生型EGFR的遷移位置，可以確定是否存在EGFRvIII。
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