雙向凝膠電泳為什麼能一次性分離上千種蛋白質？

雙向凝膠電泳（2D-PAGE）是一種高效的蛋白質分離技術，它能夠在一次實驗中分離上千種蛋白質。其能力主要歸因於它依次使用了兩種不同的分離機制：




1.第一維度：等電聚焦（IEF）

• 原理：蛋白質根據其等電點（pI，蛋白質不帶電荷的pH值）被分離。在一定的pH梯度下，蛋白質會遷移到它們的等電點位置，即蛋白質的淨電荷為零的地方。
• 結果：在這個階段，蛋白質主要是根據它們的等電點被分離的，每種蛋白質遷移到其特定的pH位置。




2.第二維度：SDS-PAGE

• 原理：在第一維分離後，蛋白質樣品被再次分離，這次是基於蛋白質的分子量。SDS（十二烷基硫酸鈉）是一種表面活性劑，能夠將蛋白質變性並賦予它們負電荷，使蛋白質根據大小（分子量）進行遷移。
• 結果：在這個階段，蛋白質進一步被根據它們的分子量分離。




透過組合這兩種分離機制（等電點和分子量），雙向凝膠電泳能夠在二維平面上分離蛋白質。每種蛋白質根據它們的等電點和分子量被分配到凝膠上的一個特定位置。這使得分析複雜的蛋白質樣品成為可能，因為每個蛋白質點在二維凝膠上佔據一個唯一的位置。與一維蛋白質電泳相比，這大大增加了分離和識別不同蛋白質的能力。




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