我們要做western blot 實驗,主要做白色脂肪,怎樣進行蛋白定量呢?
首先,你需要將白色脂肪組織進行適當的處理和裂解以提取蛋白質。一種常見的選擇是RIPA緩衝液,它可以有效地破壞細胞膜並釋放細胞內的蛋白。同時,不要忘記新增蛋白酶和磷酸酶抑制劑,以防蛋白被降解。
提取蛋白後,接下來就是蛋白質的定量。BCA蛋白定量試劑盒是一個不錯的選擇。你只需取適量的蛋白樣品和標準品,按照說明書加入BCA工作液,然後在37°C孵育30分鐘,之後用分光光度計在562 nm的波長下讀取吸光值。透過比較樣品和標準品的吸光值,就可以計算出樣品的蛋白濃度。
接下來,按照得到的蛋白濃度,用Loading Buffer稀釋樣品,並進行沸騰以完全變性蛋白。然後進行SDS-PAGE電泳,蛋白轉膜,抗體孵育和訊號檢測等步驟。
百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
提交需求
How to order?