為啥WB跑蛋白的時候,樣品連成一條線了?
當進行WB實驗時,樣品在膜上連成一條線的現象是由於蛋白質在電泳分離和轉移過程中的堆積效應以及蛋白質的連續性所導致的。這種現象在一些情況下可能會對實驗結果的解讀產生影響,因此在進行WB實驗時,需要注意樣品的載入量和電泳條件的最佳化,以確保蛋白質在凝膠和膜上的分離和轉移效果最佳。
1.蛋白質電泳分離過程中的堆積效應:
在進行SDS-PAGE電泳分離時,蛋白樣品會被載入到凝膠孔中,然後透過電場遷移。由於蛋白質的大小和電荷不同,遷移速度也會有所不同。當樣品中的蛋白質在凝膠中遷移時,較大的蛋白質會相對較慢地遷移,而較小的蛋白質會相對較快地遷移。這樣,蛋白質在凝膠中會逐漸分離成不同的帶狀區域。
2.蛋白轉移過程中的堆積效應:
在將蛋白質從凝膠轉移到膜上的過程中,通常使用電泳轉印技術。在這個過程中,蛋白質會透過電場從凝膠中轉移到膜上。然而,由於蛋白質的大小和電荷不同,轉移速度也會有所不同。較大的蛋白質會相對較慢地轉移到膜上,而較小的蛋白質會相對較快地轉移到膜上。這樣,蛋白質在膜上會逐漸分離成不同的帶狀區域。
3.蛋白質的連續性:
當蛋白質在凝膠中分離成不同的帶狀區域後,轉移到膜上時,這些帶狀區域會保持其連續性。這意味著,如果樣品中的蛋白質在凝膠中形成一條連續的帶狀區域,那麼在轉移到膜上時,這條連續的帶狀區域也會在膜上形成一條連續的線。
百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
How to order?