為什麼 SDS-PAGE 電泳前要煮蛋白?
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)電泳是一種常用的蛋白質分離技術。在進行SDS-PAGE電泳前煮蛋白的原因可以從以下幾個方面來解釋:
1. 蛋白質變性
透過加熱和SDS的作用,蛋白質的三維結構被破壞,轉變為線性結構。這樣可以消除蛋白質之間的相互作用,使得蛋白質在電泳過程中的遷移不受其原始構象的影響。
2. SDS與蛋白質的結合
SDS是一種陰離子表面活性劑,能與蛋白質的多肽鏈結合,使蛋白質帶有均一的負電荷。這樣,蛋白質在電泳過程中的遷移速率主要取決於其分子大小,而不是原始的電荷。
3. 促進樣品與緩衝液混合
加熱有助於樣品與緩衝液充分混合,確保SDS等試劑與蛋白質充分反應。
4. 減少樣品的粘稠度
透過加熱,可以降低樣品的粘稠度,使其更容易被載入到凝膠孔中。
5. 殺滅可能的微生物汙染
加熱還可以殺滅樣品中可能存在的微生物,減少實驗過程中的汙染風險。
SDS-PAGE電泳前的加熱步驟是爲了確保蛋白質完全變性和與SDS充分結合,從而實現對蛋白質按分子大小的有效分離。
百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
How to order?