SDS-PAGE電泳,蛋白marker跑不開,這是為什麼?
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一種常用的蛋白質分析技術,它可以根據蛋白質的分子量進行分離。在這個過程中,蛋白質標記(Protein Marker)是非常重要的,它可以作為參照物來確定樣品中蛋白質的大致分子量。如果你發現蛋白質標記在電泳過程中跑不開,可能有以下幾種原因:
1. 電泳條件不適當:
電泳條件包括電壓、電流、時間等,如果這些條件設定不合適,可能會導致蛋白質標記跑不開。例如,電壓過低可能會導致蛋白質運動速度過慢,而電壓過高可能會導致蛋白質降解或電泳膠過熱。
2. 樣品處理不當:
在進行SDS-PAGE電泳前,需要對樣品進行適當的處理,如加熱、加入SDS等。如果這些步驟操作不當,可能會影響蛋白質的解離和電泳效果。
3. 電泳膠的問題:
電泳膠的濃度、PH值、溫度等都會影響蛋白質的運動。如果電泳膠製備不當或儲存條件不合適,可能會影響電泳效果。
4. 蛋白Marker的問題:
如果Marker本身有問題,如過期、質量不佳等,也可能會影響電泳效果。
爲了解決這個問題,你可以從以下幾個方面進行嘗試:
1.檢查電泳裝置和條件:
確保電泳裝置正常工作,電壓、電流、時間等設定合適。
2.檢查樣品處理步驟:
確保樣品處理步驟正確,如加熱時間、溫度、SDS的新增量等。
3.檢查電泳膠:
確保電泳膠製備正確,PH值、濃度、溫度等都在適當的範圍內。
4.更換蛋白Marker:
如果以上都沒有問題,可以考慮更換新的蛋白Marker,看是否能改善電泳效果。
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