血管組織蛋白N端測序
血管組織在維持人體健康中扮演著關鍵角色,是血液迴圈的主要通道。血管疾病,如動脈粥樣硬化、高血壓和糖尿病性血管病變,是全球範圍內的主要健康問題。蛋白質的N端測序,即確定蛋白質N-端氨基酸的序列,對於理解蛋白質的功能和其在血管疾病中的角色至關重要。百泰派克生物科技(BTP)採用先進技術平臺進行血管組織中蛋白質的N端測序,旨在為血管生物學研究和臨床應用提供更深入的見解。
BTP血管組織蛋白N端測序技術平臺
1.Edman降解法
百泰派克生物科技採用島津公司Edman測序系統,為廣大科研工作者和科研客戶蛋白N端測序服務。採用我們的測序系統,可以測定N端30個氨基酸的序列資訊。採用特定的蛋白上樣系統,可以測定N端的60-70個氨基酸。
圖1. Edman測序實驗流程圖
血管組織蛋白的純度和用量:
a. 樣品需要量在1-10 ug
b. 樣品純度要>90%
c. Buffer中不要使用表面活性劑,並儘可能降低溶液的鹽濃度
d. Tris, glycine, guanidine, glycerol, sucrose, ethanolamine, SDS, Triton, X-100, Tween和其他的去垢劑,ammonium sulfate和其他的銨鹽均會對後續的氨基酸鑑定產生影響,在樣品準備過程中要避免使用
圖2. Edman測序研究案例
2.高解析度質譜平臺
百泰派克生物科技也建立了以先進的LC-MS/MS技術進行N-端測序的平臺,可以測出封閉和修飾的蛋白質末端,與Edman降解法形成互補,保證N端測序服務的順利進行。較Edman降解法而言,質譜法測序的優點在於,質譜法更敏感,可以更快地裂解肽,可以識別末端封閉或修飾的蛋白樣品。
圖3. 蛋白質N端質譜測序流程
實驗儀器:
高效液相色譜串聯質譜儀:高效液相色譜儀-Easy-nLC 1200;
電噴霧-組合型離子阱Orbitrap 質譜儀-Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer。
圖4. 蛋白質N端質譜測序案例
二、應用領域
1.蛋白質功能的解析
N端測序有助於確定蛋白質的活性位點和功能域,從而揭示其在血管形成和修復中的作用。例如,對血管內皮生長因子(VEGF)等關鍵蛋白的N端測序可以揭示其與受體結合和訊號傳導的關係。
2.生物標誌物的發現
血管組織蛋白的N端序列可以用於識別特定血管疾病的生物標誌物。例如,在動脈粥樣硬化的研究中,透過分析受損血管組織中的蛋白質,可以發現與疾病程序相關的特定蛋白質變化。
3.藥物靶標的鑑定
透過分析血管疾病模型中蛋白質的N端序列,可以鑑定潛在的藥物靶標。這對於開發治療心血管疾病的新藥具有重要意義。
血管組織蛋白的N端測序在血管生物學研究中的應用廣泛而深遠。從疾病標誌物的識別到蛋白質功能的解析,再到新藥靶標的鑑定,這項技術在揭示心血管疾病的分子機制和促進新治療方法的發展方面顯示出巨大的潛力。BTP血管組織蛋白質的N端測序技術爲了解血管生物學和疾病機制提供了重要工具,助力蛋白質N端序列精確鑑定,歡迎免費諮詢!
百泰派克生物科技——生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商
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