如何驗證肽的結構和純度?
合成肽的純度要求取決於需求。對於某些實驗或用途,肽的純度並不重要。然而,在其他情況下,可能需要高純度、無外消旋化、缺失或側鏈修飾的肽。從歷史上看,薄層色譜(TLC)和分析型反相高效液相色譜(HPLC)曾用於檢測純度以及純化策略是否有很高的成功機率。例如,如果在使用分析型 HPLC 時色譜圖中的所有峰都被廣泛分離,則低壓反相 HPLC 也可以很好的工作。然而,在使用自動固相肽合成 (SPPS) 的高通量設定中,通常使用高壓制備型 HPLC。現在更常規地使用基於MALDI-TOF-MS和 LC-ESI-MS(MS) 的方法。驗證合成肽的結構和純度的首選技術有:氨基酸分析和質譜法。然而,沒有一種單一的生物分子表徵技術或程式是萬無一失的,建議使用多種技術來分析最終產品。
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