ATAC測序資料中,有哪些重要的質控指標?
庫複雜性:庫複雜性代表文庫中正在測序的讀長的數量,它與細胞的數量呈正相關。在ATAC測序中,細胞太少會導致過度轉座(或過度消化)產生大量的小片段,而細胞過量會造成轉座不足產生大量非常大的片段。 鹼基質量:鹼基響應的質量由分數(PHRED分數)定義,該分數是使用響應核苷酸出錯的機率計算的。PHRED分數越高,質量越高,出錯的機率越低。 比對:一旦鹼基響應被編譯為reads,就必須將它們準確地與基因組比對。兩個指標很好地反映了測序反應的質量。校準率表示對映到基因組上的reads的百分比,最佳值超過90%。比對的質量,或reads與基因組特定區域的匹配程度,被稱為MAPQ分數。最高的MAPQ值(255)用於表示單個區域對應的唯一reads,最低的MAPQ值(0)用於表示匹配到許多區域的reads。
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