抗體藥物其它翻譯後修飾(氧化、脫醯胺)分析
抗體藥物是一類透過人工合成的抗體來治療疾病的藥物,如單克隆抗體、人工合成的抗體片段、免疫毒素、抗體藥物共軛物等。蛋白質翻譯後修飾(PTMs)是指蛋白質在翻譯中或翻譯後的化學修飾過程,其在細胞分化、蛋白質降解、訊號傳導以及蛋白質相互作用等細胞過程中起著關鍵作用。氧化和脫醯胺也是其中較為重要的兩種翻譯後修飾,氧化主要影響抗體藥物中含有硫的氨基酸,如半胱氨酸等,導致抗體藥物的結構和功能改變,從而影響其治療效果。抗體藥物中天冬醯胺和谷氨醯胺殘基的非酶催化脫醯胺作為一種常見的翻譯後修飾也時常發生。抗體藥物脫醯胺可能會影響蛋白質的結構、穩定性、摺疊和聚集等,從而影響抗體藥物的安全性和有效性,因而也成為抗體藥物的關鍵質量屬性。
如何測定抗體藥物的氧化和脫醯胺等翻譯後修飾也成為藥物質控過程的重要步驟。對於抗體藥物的氧化修飾而言,通常透過高效液相色譜(HPLC)和質譜(MS)等分析技術進行檢測。透過比較處理前後的抗體藥物樣本,用HPLC和MS分析硫含有的氨基酸含量的變化,從而確定氧化的程度。脫醯胺分析方法也類似,脫醯胺反應導致氨基酸質量減少,MS可以檢測到這種質量變化。LC-MS或LC-MS/MS具有更高的靈敏度,是檢測PTMs的“金標準”。
生物製品表徵其他翻譯後修飾(氧化、脫醯胺)分析示意圖
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