重組蛋白疫苗糖鏈結構分析
重組蛋白疫苗是一類不包含完整病原體,並由異源表達系統中生產的特定蛋白質抗原配製而成的一類疫苗。重組蛋白疫苗由於其具有安全性好、穩定性強以及成本較低等幾大優勢,近年來也受到研究者們的廣泛青睞。在重組蛋白疫苗中,糖鏈修飾是一個關鍵的引數。這是因為糖鏈結構可以影響疫苗的免疫原性,從而影響疫苗的效力。例如,某些糖鏈結構可能會增加蛋白的免疫原性,而其他糖鏈結構則可能會減少免疫原性。在疫苗的生產過程中,糖鏈修飾可能會受到許多因素的影響,包括宿主細胞型別、培養條件、蛋白質摺疊過程等。因此,對疫苗的糖鏈修飾進行詳細的分析和控制是非常重要的。
解析糖鏈結構包括特定位點是否連線有多種不同的糖鏈、各糖基的排列順序、糖基本身異構體的構型、糖基的環化形式、糖基相互之間的連線方式以及分支特點等。寡糖鏈的分析通常藉助液質聯用的高分辨質譜平臺。首先,使用PNGase F糖苷酶將糖鏈從糖蛋白上水解。隨後,採用2-AB試劑對水解後的糖鏈進行衍生化標記。標記完成後,將糖鏈樣品注入液相色譜高分辨質譜平臺,進行資料採集。透過糖鏈分析軟體,對採集到的質譜原始資料進行結構解析。在分析過程中,液相色譜裝置配備了熒光檢測器,可用於糖鏈的定量。同時,串聯的高分辨質譜系統用於對糖鏈結構進行解析和鑑定。液相色譜-串聯質譜法結合了質譜和色譜技術,能夠有效地揭示寡糖鏈的結構和特性。
生物製品表徵糖鏈結構分析示意圖
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