抗體藥物等電點測定
抗體藥物是一類透過人工合成的抗體來治療疾病的藥物,透過與目標分子特異性結合從而達到治療的目的。常見的抗體藥物型別包括單克隆抗體、人工合成的抗體片段、免疫毒素、抗體藥物共軛物等。抗體藥物在治療多種疾病方面表現出顯著的療效,如癌症、自身免疫性疾病、炎症性疾病、免疫調節及眼科疾病等。電荷異質性是抗體藥物的關鍵屬性,對藥物的穩定性、溶解性、體內體外的生物學活性以及藥物的動力學功能發揮均具有重要的影響。抗體藥物的電荷異質性表徵首當其衝就是等電點的測定。
等電點是指在一個分子不攜帶淨電荷或在統計平均值上呈電中性時的pH值。精確測定等電點是抗體藥物鑑定的一個有效手段,因為特定蛋白質的等電點是固定的,這與該蛋白的組分與構象相關。用的抗體藥物等電點測定方法主要有:沉澱法、分光光度法和等電聚焦法等,基於毛細管電泳的等電聚焦法憑藉其耗時短、精確度高以及樣本用量少等優點已成為等電點測定的強有力工具。毛細管等電聚焦法利用蛋白質在等電點時淨電荷為零的原理將待測蛋白質在特殊的緩衝液中進行聚丙烯凝膠電泳,這種特殊的緩衝液為兩性電解質,可以在凝膠內形成連續的pH梯度,當電泳完畢時,蛋白質遷移到的位置對應的pH就是該蛋白質的等電點。
生物製品表徵等電點測定示意圖
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百泰派克生物科技抗體藥物表徵內容
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