多肽藥物遊離巰基含量分析
多肽藥物是由多個氨基酸透過肽鍵連線而成的生物活性分子,通常來說,它由10~100個氨基酸連線而成,相對分子質量低於10000。多肽藥物大多來源於內源性肽或者天然肽,因此對人體沒有副作用或者副作用很小。相比於蛋白類藥物,多肽藥物還具有穩定性好、純度高、生產成本低、免疫原性低等優勢,加上多肽合成技術的快速發展與成熟,使得多肽藥物成為近些年生物藥研發的焦點。目前,多肽藥物已廣泛應用於腫瘤治療、自身免疫性疾病以及某些心血管疾病、糖尿病等的診斷和治療,具有廣闊的應用前景。
巰基在多肽藥物中扮演者非常重要的角色,尤其是在二硫鍵的形成中。然而,有一部分巰基會以遊離形式存在,這些巰基一定程度上會影響多肽藥物的結構甚至是結構功能。此外,由於多肽藥物在細胞系、細胞培養工藝以及分離純化等過程中存在差異,導致這些巰基的含量也存在差異。因此,對多肽藥物的遊離巰基進行準確測量,對確保藥物質量和療效具有重要價值。
生物製品表徵遊離巰基含量分析示意圖
Ellman法是檢測自由巰基含量的常規方法,DTNB試劑可以與遊離巰基反應生成2-硝基-5-巰基苯甲酸(TNB-),在中性或鹼性pH條件下的水中,TNB-可以進一步離子化TNB2-二價陰離子。這種TNB2-離子呈現黃色,在412nm有很強的吸收。透過測定在412nm可見光吸光度就可以定量TNB2-,然後利用半胱氨酸標準品定量巰基或者基於摩爾吸收率定量巰基的方法對自由巰基進行定量。
百泰派克生物科技(BTP)採用ISO9001認證質量控制體系管理實驗室,獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務。我們基於Ellman法原理建立了自由巰基定量檢測平臺,為您提供一站式的多肽藥物遊離巰基含量分析服務,只需要將您的實驗目的告訴我們並寄送樣品,百泰派克生物科技負責所有專案後續,包括樣品處理、上機分析、資料分析和專案報告。歡迎免費諮詢。
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