重組蛋白疫苗蛋白濃度測定
重組蛋白疫苗是一類不包含完整病原體,並由異源表達系統中生產的特定蛋白質抗原配製而成的一類疫苗。常見的異源表達系統有:細菌、哺乳動物細胞、植物細胞和昆蟲細胞等,往往需要根據所生產的抗原種類選擇合適的異源表達系統。重組蛋白疫苗由於其具有安全性好、穩定性強以及成本較低等幾大優勢,近年來也受到研究者們的廣泛青睞。目前,重組蛋白疫苗已被廣泛應用於多種傳染病,如預防乙型病毒性肝炎(即乙肝)、破傷風、百日咳、流行性感冒等等。
在製備和使用重組蛋白疫苗的過程中,蛋白濃度分析是必不可少的一步。蛋白質濃度能夠反映藥物的療效和安全性,對於藥物的研發、生產和使用都具有重要意義。常見的蛋白質濃度分析方法有Bradford法、Lowry法、BCA法、紫外吸收光譜法等。
Bradford法:基於染料結合的蛋白質濃度測定法,這種方法的優點是快速、方便,不易受其他物質干擾,但對蛋白質的型別和結構比較敏感。Lowry法是一種傳統的蛋白質濃度測定法,Lowry法靈敏度較高,但反應步驟多,操作起來比較複雜。BCA法:也叫做雙氰胺法,其原理與Lowry法類似,BCA法的操作相對簡單,且不易受到其他物質的干擾,但對蛋白質的型別和結構也有一定的敏感性。紫外吸收光譜法:蛋白質的紫外吸收光譜法是基於蛋白質中的芳香族氨基酸在280nm處有強吸收的特性,此法的優點是測定快速,不需要任何化學試劑,但需要知道蛋白質的組成和序列,以計算出準確的摩爾吸光係數。
生物製品表徵蛋白濃度測定示意圖
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