重組蛋白疫苗糖基化位點(N糖、O糖)檢測
重組蛋白疫苗是一種新型的疫苗產品,由基因工程技術在生物體內或細胞體系中生產。在這些疫苗的生產過程中,可能會發生糖基化反應,即在蛋白質的N位點(如天冬氨酸)和O位點(如絲氨酸或蘇氨酸)上新增糖鏈。糖基化是一種重要的蛋白質翻譯後修飾,影響蛋白質的穩定性、溶解性、生物活性等,因此,對於重組蛋白疫苗的質量控制和效果評價,檢測和分析糖基化位點是非常重要的。
糖基化位點的檢測方法有很多。最常見的是質譜分析,它可以精確地確定糖鏈的組成和連線方式。這通常需要對蛋白質進行酶切,產生帶有糖基化位點的肽段,然後透過質譜分析來識別和定量這些肽段。除此之外,高效液相色譜也是一個重要的工具,它可以用於分離和定量糖鏈,透過使用特定的熒游標記,可以對糖鏈進行定量分析。還有一些更高階的技術,如核磁共振和X射線晶體學,可以用來研究糖基化的詳細結構。透過這些方法,科學家們可以深入瞭解疫苗的糖基化情況,進而最佳化生產工藝,提高疫苗的安全性和效果。
生物製品表徵糖基化位點(N糖、O糖)檢測示意圖
重組蛋白疫苗糖基化位點分析方法中,質譜法檢測糖基化位點具有極高的靈敏度,可以測量到飛摩爾濃度水平的樣品,同時質譜法可用於分析完整的和零散的糖蛋白樣本或肽段,也能夠檢測和分析未知的糖肽和糖蛋白化合物。
百泰派克生物科技(BTP)採用ISO9001認證質量控制體系管理實驗室,獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務。我們有MALDI TOF MS及nano LC-ESI-MS/MS兩項質譜分析技術,為您提供高效精準的重組蛋白疫苗糖基化鑑定服務。在收取樣品後,我們首先對樣品進行酶切,釋放抗體的Fc domain和Fab,然後對糖基化片段進行分離,透過MALDI TOF MS或nano LC-ESI-MS/MS對糖基化位點進行確證。
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