重組蛋白疫苗等電點測定
重組蛋白疫苗是一類不包含完整病原體，並由異源表達系統生產的特定蛋白質抗原配製而成的一類疫苗。常見的異源表達系統有：細菌、哺乳動物細胞、植物細胞和昆蟲細胞等，往往需要根據所生產的抗原種類選擇合適的異源表達系統。重組蛋白疫苗由於其具有安全性好、穩定性強以及成本較低等幾大優勢，近年來也受到研究者們的廣泛青睞。目前，重組蛋白疫苗已被廣泛應用於多種傳染病，如預防乙型病毒性肝炎（即乙肝）、破傷風、百日咳、流行性感冒等等。電荷異質性是重組蛋白疫苗的關鍵屬性，對藥物的穩定性、溶解性、體內體外的生物學活性以及藥物的動力學功能發揮均具有重要的影響。重組蛋白疫苗的電荷異質性表徵首當其衝就是等電點的測定。
等電點是指在一個分子不攜帶淨電荷或在統計平均值上呈電中性時的pH值。精確測定等電點是重組蛋白疫苗鑑定的一個有效手段，因為特定蛋白質的等電點是固定的，這與該蛋白的組分與構象相關。此外，蛋白質等電點也是許多常見生化分析、蛋白組學實驗中的一項重要指標，例如雙向凝膠電泳（2D-PAGE）、X射線結晶、液質聯用等實驗中。
生物製品表徵等電點測定示意圖
常用的重組蛋白疫苗等電點測定方法主要有：沉澱法、分光光度法和等電聚焦法等，基於毛細管電泳的等電聚焦法（cIEF）憑藉其耗時短、精確度高以及樣本用量少等優點已成為等電點測定的強有力工具。cIEF利用蛋白質在等電點時淨電荷為零的原理將待測蛋白質在特殊的緩衝液中進行聚丙烯凝膠電泳，這種特殊的緩衝液為兩性電解質，可以在凝膠內形成連續的pH梯度，當電泳完畢時，蛋白質遷移到的位置對應的pH就是該蛋白質的等電點。
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