揭秘蛋白質相對分子質量測定:常用方法全面解析
蛋白質是生物體內重要的功能分子,其相對分子質量的測定對於瞭解蛋白質的結構和功能至關重要。本文將介紹常用的蛋白質相對分子質量測定方法,包括凝膠電泳、質譜分析和光學方法。
圖1
1. 凝膠電泳
凝膠電泳是一種常用的蛋白質相對分子質量測定方法。它透過將蛋白質樣品分離成不同的帶狀條帶,根據條帶的遷移距離和已知分子質量的標準品進行比較,可以推斷出待測蛋白質的相對分子質量。
1.1 SDS-PAGE
SDS-PAGE是一種基於聚丙烯醯胺凝膠電泳的方法,透過使用陰離子表面活性劑SDS使蛋白質帶負電荷,使其在電場中按照分子質量大小進行遷移。透過與已知分子質量的標準品比較,可以確定待測蛋白質的相對分子質量。
1.2 聚丙烯醯胺凝膠電泳
聚丙烯醯胺凝膠電泳是一種常用的蛋白質分離方法,透過將蛋白質樣品在凝膠中進行電泳,根據蛋白質的分子質量和電荷特性,使其在凝膠中形成不同的帶狀條帶,從而推斷出蛋白質的相對分子質量。
2. 質譜分析
質譜分析是一種高靈敏度的蛋白質相對分子質量測定方法。它透過將蛋白質樣品離子化,並在質譜儀中進行分析,根據離子的質荷比和豐度,可以推斷出蛋白質的相對分子質量。
2.1 MALDI-TOF質譜
MALDI-TOF質譜是一種常用的質譜分析方法,它透過將蛋白質樣品與基質混合後,透過鐳射脫附離子化,然後透過飛行時間質譜儀進行分析。根據離子的質荷比和豐度,可以推斷出蛋白質的相對分子質量。
2.2 ESI-MS質譜
ESI-MS質譜是一種常用的質譜分析方法,它透過將蛋白質樣品在電噴霧離子源中離子化,然後透過質譜儀進行分析。根據離子的質荷比和豐度,可以推斷出蛋白質的相對分子質量。
3. 光學方法
光學方法是一種非常便捷的蛋白質相對分子質量測定方法。它透過測量蛋白質在特定波長下的吸光度,根據比色法或比濁法,可以推斷出蛋白質的相對分子質量。
3.1 比色法
比色法是一種常用的光學方法,透過測量蛋白質在特定波長下的吸光度,根據已知濃度的標準品和比色曲線,可以推斷出待測蛋白質的相對分子質量。
3.2 比濁法
比濁法是一種常用的光學方法,透過測量蛋白質溶液中懸浮顆粒的光散射,根據已知濃度的標準品和比濁曲線,可以推斷出待測蛋白質的相對分子質量。
結論
蛋白質相對分子質量的測定是生物藥物研究中的重要環節。本文介紹了常用的測定蛋白質相對分子質量的方法,包括凝膠電泳、質譜分析和光學方法。這些方法各有優劣,研究人員可以根據實驗需求選擇合適的方法進行蛋白質相對分子質量的測定。
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