蛋白質純度測定：選擇適合的方法有哪些？

1.引言




蛋白質是生物體內重要的生物大分子，其純度直接影響著生物藥物的質量和效力。因此，準確測定蛋白質的純度是生物製品蛋白組學領域中至關重要的任務。在純度測定中，選擇適合的方法非常重要，本文將介紹幾種常見的測定方法。




2.SDS-PAGE凝膠電泳




SDS-PAGE凝膠電泳是一種常用的蛋白質純度測定方法。它透過根據蛋白質的分子量，將樣品中的蛋白質分離成帶狀，然後透過染色或蛋白質標記技術進行定性和定量分析。這種方法簡單易行，適用於常規純度測定和樣品預處理。




3.高效液相色譜（HPLC）




HPLC是一種高解析度的分離技術，可用於測定蛋白質的純度。常用的方法包括反相HPLC和凝膠過濾HPLC。反相HPLC基於蛋白質的親水性差異進行分離，而凝膠過濾HPLC則是透過分子篩原理分離不同大小的蛋白質。HPLC具有高解析度和高靈敏度的優勢，特別適用於複雜樣品的純度測定。




4.尺寸排阻色譜（SEC）




尺寸排阻色譜是一種基於蛋白質分子大小的分離技術。在SEC中，大分子的蛋白質會更快地透過填充物，而小分子的蛋白質則會較慢地透過。透過測定樣品中峰的位置和峰面積，可以得出蛋白質的相對含量和純度。




5.光譜法




光譜法是一種透過測定蛋白質在特定波長下的吸光度來推斷其濃度和純度的方法。紫外-可見光譜法（UV-Vis）是其中最常用的一種，它可用於測定蛋白質的蛋白質含量和純度，但對於複雜樣品可能需要進一步配合其他方法進行分析。




6.結論與展望




蛋白質的純度測定對於生物製品蛋白組學領域具有重要意義。選擇適合的測定方法對於保證生物藥物研發和生產的質量至關重要。在實際應用中，可以根據樣品的複雜性、分析的目的和實驗條件等因素綜合考慮，選擇合適的方法進行蛋白質純度測定。



圖1




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