高精度解讀：PRM檢測方法在多肽藥物高分辨分子量測定中的精準應用

多肽藥物是一類由氨基酸組成的生物大分子，具有廣泛的臨床應用價值。在生物製藥領域，準確測定多肽藥物的分子量對於藥物的質量控制和效力評估至關重要。而PRM（Parallel Reaction Monitoring）檢測方法作為一種高分辨、高精度的質譜技術，在多肽藥物的分子量測定中展現出巨大的潛力。

一、PRM檢測方法簡介

PRM（Parallel Reaction Monitoring）檢測方法是一種高分辨、高靈敏的質譜技術，用於定量分析蛋白質和肽段。它是一種靶向性質譜分析方法，可以實現對特定肽段的選擇性監測和定量測定。

圖1

PRM檢測方法與傳統的資料依賴性採集方式相比具有許多優勢。傳統的資料依賴性採集方式是透過預先選擇一組肽段進行質譜分析，而PRM則透過在同一次實驗中選擇性地監測所有感興趣的肽段。這使得PRM具有更高的解析度和靈敏度，能夠準確定量目標肽段的存在和豐度。

PRM檢測方法的基本步驟如下：

1.肽段選擇：

根據研究的目的和需求，選擇待測的肽段。這些肽段可以是已知的蛋白質序列中的特定片段，也可以是針對研究物件進行設計的特定序列。

2.質譜儀設定：

調整質譜儀的引數和方法設定，確保能夠實現高分辨、高靈敏的質譜分析。常用的質譜儀包括Q-TOF（四極杆-飛行時間）質譜儀和三重四極杆質譜儀等。

3.樣品製備：

根據需要，對待測樣品進行前處理和消化，將蛋白質降解為肽段。常用的前處理方法包括還原、破碎和胰蛋白酶消化等。

4.PRM分析：

在質譜儀中設定並執行PRM方法。PRM使用先導掃描（MS1）選擇目標肽段，並使用並行反應監測（MRM）模式對其進行定量分析。透過比對實驗中得到的質譜資料與事先設定的肽段質譜庫進行匹配，可以準確測定目標肽段的存在和豐度。

PRM檢測方法在生物醫學研究中具有廣泛的應用。它可以用於蛋白質定量分析、肽段定量分析、翻譯後修飾的研究以及生物標誌物的鑑定等。其高分辨、高靈敏的特點使其成為生物製藥和臨床研究中重要的工具，可用於藥物研發、生物製品質量控制和臨床診斷等領域。

二、PRM檢測方法在多肽藥物分子量測定中的應用

1.高分辨分子量測定：

PRM檢測方法利用高分辨質譜儀的優勢，能夠實現對多肽藥物的高分辨分子量測定。透過選擇性離子監測多個肽段，PRM能夠準確確定每個肽段的分子量，從而揭示多肽藥物的組成和異構體分佈。

圖2

2.精準定量分析：

PRM檢測方法的高靈敏度和準確性使其在多肽藥物的精準定量分析中具有優勢。透過事先選擇的肽段進行定量測定，PRM能夠準確確定不同樣品中多肽藥物的丰度差異，實現精準的定量結果。

圖3

3.質量控制與批次一致性評估：

多肽藥物的質量控制和批次一致性評估是保證藥物安全和療效的重要環節。PRM檢測方法可用於分析不同製劑批次中多肽藥物的分子量差異，為藥物質量控制和批次一致性評估提供準確的資料支援。

4.生物相似性評估：

對於生物類似藥物（Biosimilars）的開發和生產，PRM檢測方法能夠提供高分辨的分子量測定，用於評估生物類似藥物與原研藥的相似性。透過比較不同藥物的分子量差異，可以評估生物類似藥物的結構相似性和一致性。

PRM檢測方法作為一種高分辨、高精度的質譜技術，在多肽藥物高分辨分子量測定中具有精準應用的優勢。其在多肽藥物的分子量測定、精準定量分析、質量控制與批次一致性評估以及生物相似性評估等方面展現出潛力與前景。隨著技術的進一步發展和應用的推廣，PRM檢測方法將為多肽藥物的研發和質量控制提供更為可靠和精準的分析手段。

百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商

相關服務：

基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ，TMT，SILAC