N-糖譜分析
- 生物醫藥研究：N-糖譜分析在生物藥物（如抗體藥物）的開發和質量控制中非常重要。
- 疾病診斷與研究：某些疾病會影響細胞表面的糖鏈模式，因此這項技術在疾病標誌物的識別和機制研究中發揮作用。
- 細胞生物學和免疫學：分析細胞表面的糖鏈變化有助於理解細胞間的相互作用和訊號傳遞。
N-糖譜分析（N-glycan profiling）是一種用於分析蛋白質N-連結型糖鏈結構和組成的技術。這種糖鏈是一類共有的生物大分子，廣泛存在於真核生物中，特別是在細胞表面和分泌蛋白質中。N-糖譜分析對於理解蛋白質的功能、細胞訊號傳導、細胞識別和疾病發生機制至關重要。
一、N-糖譜分析基本步驟
圖1.N糖鏈分析的一般流程（以抗體為例）
1.樣本準備：
從目標蛋白質或複合物中提取蛋白質樣品。這可能涉及到蛋白質的純化和濃縮步驟，以確保糖譜分析的準確性和效率。
2.釋放N-糖鏈：
使用特定的酶，如肽-N-甘露糖醯胺酶（PNGase F），處理蛋白質樣品以釋放N-連結型糖鏈。這一步驟是必需的，因為糖鏈在蛋白質上是共價連線的。
3.糖鏈純化：
釋放的N-糖鏈可能需要透過色譜或其他方法進一步純化，以去除蛋白質、肽段和其他可能干擾分析的物質。
4.標記（可選）：
爲了提高檢測靈敏度和解析度，可以對純化的N-糖鏈進行熒光或其他型別的標記。
5.分離和檢測：
使用高效液相色譜（HPLC）、毛細管電泳（CE）或質譜（MS）等技術分離並檢測N-糖鏈。這些技術可以提供糖鏈的定性和定量資訊。
6.糖鏈結構鑑定：
透過對分離後糖鏈的進一步質譜分析，結合酶解和化學方法，對糖鏈的結構進行詳細鑑定。這可能涉及到糖鏈的碎片分析，以確定糖單元的序列和連線方式。
7.資料分析：
利用專門的軟體和資料庫，分析和解釋得到的資料，以確定糖鏈的組成、結構和多樣性。這包括比較不同樣本或條件下的糖譜差異。
二、應用
N-糖譜分析對於理解蛋白質的功能、穩定性和分子間相互作用至關重要，特別是在生物製藥（如治療性抗體的生產）和疾病診斷領域。
百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務：
提交需求
How to order?
