蛋白質泛素化檢測
蛋白質泛素化檢測是一種用於鑑定和分析蛋白質上泛素化修飾的生物化學技術。泛素化是一種涉及將小蛋白質泛素與目標蛋白質的賴氨酸殘基共價連線的翻譯後修飾過程，這種修飾在調節蛋白質降解、訊號傳導、細胞週期控制等方面起著關鍵作用。
自20世紀70年代泛素發現後逐漸發展，主要利用免疫沉澱、西方印跡和質譜等技術，這些方法提高了對泛素化事件的檢測靈敏度和特異性，允許研究者詳細分析泛素化在疾病和細胞過程中的作用。
圖1. 泛素化修飾研究路線
1、免疫印跡（Western Blot）：
這是最常用的檢測方法之一。透過使用針對泛素的抗體，可以檢測到泛素化的蛋白質。如果一個蛋白質被泛素化，它的分子量將因泛素的新增而增加，這通常在凝膠上表現為一系列上移的帶。
2、免疫沉澱（Immunoprecipitation, IP）：
此方法可用於富集特定泛素化蛋白質，然後透過免疫印跡進行檢測。透過使用特定蛋白質的抗體進行免疫沉澱，然後使用泛素抗體進行檢測。
3、質譜分析（Mass Spectrometry, MS）：
質譜分析可以用於鑑定泛素化的特定位點和泛素化型別（如單泛素化或多泛素鏈）。這種方法可以提供更詳細的資訊，包括泛素化發生的確切氨基酸殘基。
泛素化檢測有助於理解泛素化在細胞生理和病理過程中的作用，特別是在研究蛋白質降解、訊號傳導障礙以及與多種疾病（如癌症和神經退行性疾病）相關的分子機制方面。
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