蛋白質一級結構測定方法
蛋白質分子是由許多氨基酸透過肽鍵連線而成的生物大分子。體內具有生理功能的蛋白質都是有序結構。每種蛋白質都有一定的氨基酸質量百分比、氨基酸的序列以及肽鏈空間的特定排列位置。因此，由氨基酸序列和肽鏈空間排列組成的蛋白質分子結構是每種蛋白質具有獨特生理功能的結構基礎。
構成人體蛋白質的氨基酸有20多種，這些氨基酸的序列和空間位置幾乎是無窮無盡的。不同的氨基酸序列和特定的空間排列可以在人體內創造出數以萬計的蛋白質，並完成生命賦予的數以千萬計的生理功能。
1952年，丹麥科學家提出將蛋白質複雜的分子結構分為4個層次，即一級、二級、三級和四級結構。後三者統稱為高層結構或空間構象。在蛋白質分子中，從N端到C端的氨基酸序列稱為蛋白質的一級結構。一級結構中的主要化學鍵是肽鍵。另外，蛋白質分子中所有二硫鍵的位置也屬於一級結構的範疇。
爲了表徵蛋白質，常用的方法有：
1.Edman 降解法：
這是一種傳統的蛋白質N端序列測定方法，透過逐步移除蛋白質N端的氨基酸，並鑑定每一步移除的氨基酸，可以在不干擾肽鍵的情況下標記和分析N端氨基酸序列。但該方法不適合N端封閉或化學修飾。
2.質譜法（Mass Spectrometry）：
這是目前最常用和最有效的方法之一。質譜可以精確地測定蛋白質或肽段的質量，並透過碎片模式幫助推斷氨基酸序列。特別是串聯質譜（Tandem MS，或MS/MS）技術，透過兩級質量分析，能更詳細地分析蛋白質的氨基酸序列。
3.基因組測序和生物資訊學分析：
由於蛋白質是由基因編碼的，透過測定相應基因的DNA序列並進行生物資訊學上的翻譯，可以推斷出蛋白質的氨基酸序列。
圖1.蛋白質一級結構的測定
以上每種方法都有其優勢和侷限性。例如，質譜分析速度快、靈敏度高，但對樣品的純度和量有一定要求；而Edman降解適用於較短的序列，但速度較慢。在實際應用中，常常會根據樣品的性質和可用資源，選擇最合適的方法或多種方法結合使用
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