質譜流式細胞技術流程:實現細胞級蛋白質分析的關鍵步驟
1.質譜流式細胞技術概述
質譜流式細胞技術(Mass Cytometry)是一種基於時間飛行質譜的細胞分析技術,可以在單個細胞級別上分析數十甚至上百個引數,為解析細胞的複雜性和異質性提供了強大的工具。
2.樣品製備
使用質譜流式細胞技術的首個步驟是樣品製備。這通常涉及對單個細胞的收集,隨後進行必要的處理以用於後續的標記過程,如固定、滲透和阻斷等。
3.抗體標記
在樣品製備後,接下來是使用稀土金屬標記的抗體進行標記。每種抗體都針對特定的生物標誌物,如蛋白質或磷酸化位點,並且每種抗體都透過特定的稀土金屬進行標記,使得它們可以在後續的質譜分析中被區分開來。
4.資料獲取
在完成抗體標記後,樣品被送入質譜流式細胞儀器。在儀器中,樣品被氣化並被電離,然後透過時間飛行質譜儀進行分析。每個細胞被檢測到的金屬離子訊號反映了該細胞中對應生物標誌物的量。
5.資料分析
獲得的原始資料需要經過專門的軟體進行處理和分析,包括質控、標準化、聚類分析等,以識別不同的細胞群體和它們的功能狀態,從而得到生物學意義。
質譜流式細胞技術的流程,儘管涉及到多個複雜的步驟,但每一步都至關重要,缺一不可。這個流程成功地實現了在單個細胞級別上的高參數蛋白質分析,提供了前所未有的深度和廣度來理解細胞的複雜性和異質性,這對於生物學研究,特別是生物藥物研究具有重大意義。透過質譜流式細胞技術,我們可以深入探索細胞在不同狀態下的蛋白質表達和功能,揭示生物過程和疾病發生髮展的細胞機制,為疾病的診斷和治療提供關鍵資訊。
圖1
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