圓二色光譜法分析蛋白質二級結構

    圓二色光譜(CD)是一種廣泛用於研究蛋白質二級結構和其變化的方法。透過分析蛋白質的CD光譜,可以得到其二級結構的大致組成和分佈。


    一、蛋白質的二級結構主要包括:


    蛋白質結構鑑定

    圖1. 蛋白質結構鑑定


    1、α螺旋 (Alpha Helices):

    這是一種右手螺旋結構,通常在CD光譜的約222 nm和208 nm處顯示負峰。


    2、β摺疊 (Beta Sheets):

    β摺疊可以是平行或反平行的。它們在CD光譜的約218 nm處顯示正峰,而在約210-216 nm處顯示負峰。


    3、β轉角 (Beta Turns):

    這些結構在CD光譜中通常不產生很明顯的峰,但它們可以透過其在其他二級結構中的缺失來識別。


    4、無規則捲曲 (Random Coils or Unstructured regions):

    這些區域在CD光譜中在約195 nm處顯示負峰。


    二、使用CD研究蛋白質二級結構的考慮因素


    1、CD光譜主要在紫外區域(UV,約190-250 nm)進行,因為蛋白質的二級結構在這個區域有特定的光譜特徵。

    2、爲了獲得準確的二級結構資訊,需要確保樣品是純的,適當的溶劑和濃度也很重要。

    3、透過比較不同條件下的CD光譜(如不同溫度、pH或配體存在),可以研究蛋白質的穩定性和構象變化。

    4、有多種軟體和演算法可用於從CD光譜資料中計算蛋白質的二級結構成分,如CONTIN、SELCON和CDSSTR等。


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