氨基酸測定: 精確含量分析

氨基酸測定在許多生物化學和生物醫學研究中都有重要的應用。例如，它可以用於確定蛋白質的氨基酸組成，從而幫助研究者理解蛋白質的結構和功能。此外，氨基酸測定也可以用於監測生物樣本中的氨基酸水平，這對於研究各種疾病的發病機制和治療效果非常重要。

 

氨基酸測定的常用方法

 

1、高效液相色譜法（HPLC）:

 

• 原理：HPLC可以分離、鑑定和定量複雜樣品中的各種組分。在氨基酸分析中，常使用離子交換色譜和反相高效液相色譜。
• 操作：樣品首先經過適當的準備，如蛋白質水解和洗脫。然後，樣品被注入到色譜柱中，在移動相的攜帶下，不同的氨基酸會以不同的速率透過柱子，從而實現分離。
• 檢測：通常使用紫外-可見光檢測器或熒光檢測器。某些情況下，氨基酸需要預柱或者是它們透過色譜柱後的衍生化來提高檢測的敏感性。
• 定量：透過將檢測到的峰面積與已知濃度的標準品峰面積進行比較，可以定量樣品中的氨基酸。

 

2、氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）:

 

• 原理：GC-MS是一種用於分離、檢測和定量氣態或揮發性化合物的技術。
• 操作：由於氨基酸本身不揮發，所以需要透過衍生化（例如用苯甲醯氯或N-甲基-N-（叔丁基）三氟乙醯胺）將其轉化為可揮發的衍生物。
• 檢測和定量：衍生物透過氣相色譜柱分離，然後被質譜儀檢測。質譜提供了關於分子的質量和結構的資訊，從而實現定性和定量。

 

3、液相色譜-質譜聯用（LC-MS）:

 

• 原理：LC-MS結合了HPLC的分離能力和質譜的定性、定量能力。
• 操作：樣品在液相色譜柱中分離，然後離子化（通常透過電噴霧或大氣壓化學離子化），進入質譜儀。
• 檢測和定量：質譜儀可以提供有關每個組分的質量資訊，從而進行鑑定和定量。

 

4、核磁共振波譜（NMR）:

 

• 原理：NMR是一種分析分子結構和組成的技術，基於不同原子核在磁場中的共振頻率。
• 操作：可以直接用於溶液中的氨基酸，不需要複雜的樣品準備步驟。
• 檢測和定量：透過比較不同共振訊號的積分面積與已知濃度的標準品，可以實現定量。

 

氨基酸測定也面臨著一些挑戰。例如，某些氨基酸在測定過程中可能會發生化學反應，從而影響結果的準確性。此外，某些氨基酸的濃度可能非常低，這使得它們很難被準確測定。透過選擇合適的測定方法和嚴格遵循操作步驟，可以實現精確的氨基酸含量分析。

 



圖1

 

百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商

 

相關服務：

氨基酸組成分析

生物製藥分析

氨基酸組成分析

蛋白質結構鑑定

生物藥二硫鍵/遊離半胱氨酸檢測