蛋白質氨基酸組成分析

蛋白質的氨基酸組成分析是透過確定其包含的各種氨基酸的種類及其相對摩爾比例來了解蛋白質的基本構成。這種分析方法通常用於鑑定、定量和研究蛋白質和肽的化學性質和結構。下面是一些常用於蛋白質氨基酸組成分析的技術：



圖1

 

一、氨基酸分析 

 

氨基酸分析通常包括以下步驟：

 

1、蛋白質水解： 在高溫和高壓下，通常使用6 M鹽酸將蛋白質水解為單獨的氨基酸。

2、衍生化： 為提高分析的準確性和靈敏度，氨基酸通常會轉化為更易於分析的衍生物。

3、分離和檢測： 利用色譜法（例如高效液相色譜HPLC）分離衍生物，並使用紫外-可見光檢測器或熒光檢測器進行定量。

 

二、質譜法

 

1、MALDI-TOF MS：
利用基質輔助鐳射解吸/電離飛行時間質譜（Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry）可以分析和鑑定氨基酸和小肽。

 

2、電噴霧電離質譜（ESI-MS）：
電噴霧電離通常與液質聯用技術（LC-MS）結合，以分析和定量蛋白質和肽的氨基酸組成。

 

三、色譜法

 

1、離子交換色譜：

利用氨基酸的電荷特性進行分離。

 

2、反相高效液相色譜（RP-HPLC）：

通常與質譜法結合使用，以實現準確的氨基酸定量分析。

 

四、核磁共振（NMR）

 

雖然核磁共振通常用於研究蛋白質的三維結構，但透過合適的一維和二維NMR實驗，也可以獲取氨基酸的型別和環境資訊。

 



圖2

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