氧化磷酸化檢測
- 生物能量學研究：瞭解細胞能量代謝的基本原理。
- 疾病機理：研究各種疾病（如神經退行性疾病、癌症）中氧化磷酸化的改變。
- 藥物篩選與毒性測試：評估藥物對線粒體功能的影響。
- 樣本處理：需要精確的樣本處理以保持線粒體完整性。
- 實驗條件：實驗條件（如溫度、氧氣濃度）對結果有顯著影響。
氧化磷酸化是線粒體在細胞呼吸鏈中產生ATP（三磷酸腺苷）的過程，它是細胞能量代謝的關鍵步驟。在這個過程中，電子透過一系列氧化還原反應從一個載體轉移到另一個載體，並最終傳遞給氧氣，形成水。這個電子傳遞過程產生的能量被用來將磷酸團轉移到ADP（二磷酸腺苷），生成ATP。
一、檢測方法：
1.光譜法：透過測量線粒體呼吸鏈中某些成分的吸收或熒光光譜的變化來評估氧化磷酸化的效率。
2.放射性標記法：使用放射性標記的磷酸鹽，透過測量其被嵌入ATP中的程度來評估氧化磷酸化。
3.ATP產量測定：直接測量細胞或線粒體制備中產生的ATP量。這可以透過各種生化方法實現，如利用ATP依賴性的酶反應。
4.氧消耗率（OCR）測定：使用如Seahorse XF分析儀等裝置來測量細胞的氧消耗率，從而間接評估氧化磷酸化的效率。
5.熒光探針：使用特定的熒光探針來監測線粒體膜電位的變化，這與氧化磷酸化的效率密切相關。
二、應用：
三、注意事項：
圖1.磷酸化定量蛋白組學分析流程
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