甲基化分析

甲基化分析是一種用於檢測和研究DNA、RNA和蛋白質甲基化的實驗方法。蛋白質甲基化涉及將甲基基團新增到蛋白質的特定氨基酸殘基上，通常是賴氨酸或精氨酸。這種修飾對蛋白質的功能、相互作用和定位有重要影響。以下是幾種常用的蛋白質甲基化分析技術：



圖1. 甲基化定量蛋白組學研究




1. 質譜分析 (Mass Spectrometry)

• 用途: 質譜分析是識別和定量蛋白質甲基化的主要方法。它可以提供關於甲基化位點、甲基化程度和甲基化動態的詳細資訊。
• 過程: 蛋白樣品經消化、離子化後，透過質譜儀分析。軟體用於資料分析，以識別甲基化位點。

 

2. 免疫沉澱 (Immunoprecipitation)

• 用途: 使用特異性抗體富集甲基化的蛋白或肽段，可以用於後續的質譜分析或西方印跡。
• 過程: 利用針對特定甲基化位點的抗體（例如特異性的賴氨酸或精氨酸甲基化抗體）來捕獲甲基化蛋白。

 

3. 免疫印跡 (Western Blot)

• 用途: 西方印跡用於檢測樣品中甲基化蛋白的存在和豐度。
• 過程: 利用針對甲基化位點的抗體進行蛋白檢測，可以定性地分析甲基化水平。

 

4. 二維電泳 (2D Gel Electrophoresis)

• 用途: 透過分離修飾和未修飾的蛋白形式，可以觀察甲基化如何影響蛋白的等電點和分子量。
• 過程: 蛋白質首先按等電點分離，然後按分子量分離，透過染色或西方印跡視覺化。

 

5. 實時熒光共振能量轉移 (FRET)

• 用途: 用於研究甲基化如何影響蛋白質間的相互作用。
• 過程: 利用標記的蛋白質，監測甲基化狀態改變時的能量轉移變化。




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