翻譯後蛋白修飾脫醯胺檢測
蛋白翻譯後修飾 (PTM, post-translational modification) 指的是在蛋白質翻譯後發生的化學修飾,這些修飾可以影響蛋白質的活性、穩定性、親和力、半衰期和細胞內的定位。
脫醯胺是指蛋白質在翻譯後失去醯胺基團(通常是去除氨基酸側鏈上的醯胺基),這種改變可能影響蛋白質的結構、定位、功能以及與其他分子的相互作用。例如,在神經遞質釋放、細胞訊號傳遞等過程中,脫醯胺修飾的蛋白質起著調節作用。因此,準確檢測和理解脫醯胺修飾對於揭示細胞機制至關重要。
圖1.蛋白質脫醯胺化修飾過程
傳統上,脫醯胺修飾的檢測是一個挑戰,因為這種修飾往往是微妙且不穩定的。然而,隨著質譜技術的發展,特別是液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)的應用,研究人員現在能夠更準確地識別和定量這些修飾。透過精確測量蛋白質或肽段的質量變化,可以推斷出脫醯胺事件的發生。
此外,結合特定的酶切策略和富集方法,如使用特異性抗體富集脫醯胺修飾的蛋白質或肽段,可以提高檢測的靈敏度和特異性。這些技術的結合使得研究人員能夠在複雜的生物樣本中,如細胞提取物或體液中,探測到微量的脫醯胺修飾。
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