蛋白質糖基化位點分析

蛋白質糖基化是一種關鍵的蛋白翻譯後修飾，涉及將糖基團附加到蛋白質的特定氨基酸殘基上。糖基化的蛋白質（糖蛋白）在細胞中的多種過程中都有關鍵作用，如細胞間互作、細胞訊號、免疫應答等。



圖1. 糖基化修飾研究路線




1. 糖基化的型別

• N-連結糖基化：通常發生在蛋白質中的天冬醯胺-N位。特定的序列模式是Asn-X-Ser/Thr (X可以是任何氨基酸，除了脯氨酸)。

• O-連結糖基化：通常發生在蛋白質的酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸殘基上。




2. 位點分析的方法

• 質譜法：蛋白質被酶切後，透過液相質譜法(LC-MS/MS)對蛋白片段進行分析，確定糖基化位點的位置。

• 放射標記法：使用放射性標記的糖前體，如放射性標記的UDP-GlcNAc，對蛋白質進行標記後，透過電泳分離並透過自顯影檢測蛋白的糖基化。

• 化學標記法：使用特定的化學試劑，如偏心酸，與糖基化位點結合，進而透過質譜或其他方法進行檢測。






圖2. 糖基化修飾研究案例




3. 應用領域

• 生物標誌物研究：在某些疾病，如糖尿病中，非酶媒介的糖基化修飾形成的先期糖化終產物(AGEs)與疾病進展緊密相關，可以作為疾病的生物標誌物。

• 藥物開發：針對特定糖基化位點的抑制或增強，可能為新藥物的開發提供潛在靶點。

• 疾病機理研究：糖基化與許多疾病的發生和進展相關，如阿爾茨海默症、癌症和動脈硬化。




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