蛋白質磺酸修飾檢測
蛋白質磺酸修飾是一種不太常見但非常重要的蛋白翻譯後修飾方式。它涉及將磺酸基團新增到蛋白質的特定氨基酸殘基上,通常是酪氨酸殘基。與磷酸化不同,磺酸化是一個共價的永久修飾。
圖1. 蛋白質翻譯後修飾方式鑑定示意圖
常用的檢測蛋白質磺酸化方法主要有:
1、質譜分析 (Mass Spectrometry, MS):
由於磺酸化導致的質量增加,LC-MS/MS可以用來鑑定磺酸化位點。但是,磺酸化肽在MS中可能會失去磺酸基團,這使得鑑定變得具有挑戰性。MS的資料解釋通常需要特定的生物資訊學工具,以確保正確鑑定磺酸化位點。
2、Western Blot與磺酸化特異性抗體:
使用針對磺酸化蛋白或磺酸化位點的特異性抗體可以透過Western Blot方法檢測磺酸化狀態。
3、免疫熒光染色:
使用磺酸化特異性抗體,可以透過免疫熒光染色在細胞或組織切片上定位磺酸化蛋白。
4、酶聯免疫吸附試驗 (ELISA):
使用磺酸化特異性抗體可以設計ELISA,對磺酸化蛋白進行量化分析。
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