蛋白翻譯後修飾檢測方法：全面指南

蛋白質的翻譯後修飾（Post-translational modifications, PTMs）是細胞中的關鍵生物化學過程，它會改變蛋白質的化學性質、結構、功能和定位。常見的蛋白後修飾包括磷酸化、乙醯化、泛素化、糖基化、泛醯化等。檢測這些修飾對於瞭解蛋白質的功能和調節機制非常重要。以下是常用的蛋白翻譯後修飾檢測方法：

1.Western Blot:

使用對特定修飾敏感的抗體來檢測特定的蛋白修飾。例如，使用對磷酸化位點特異的抗體來檢測蛋白的磷酸化狀態。

2.免疫共沉澱 (Co-IP) 和免疫沉澱 (IP):

用於從複雜的細胞裂解物中分離和富集具有特定修飾的蛋白質。

3.質譜分析 (MS):

是當前最強大的用於檢測和定量蛋白翻譯後修飾的工具。它可以準確地鑑定蛋白的修飾位點和修飾型別。

4.放射性標記:

例如，在磷酸化研究中，可以使用放射性的γ-32P ATP來標記磷酸化的蛋白質。

5.酶聯免疫吸附試驗 (ELISA):

使用特異性抗體來檢測和定量特定的蛋白修飾。

6.熒光共振能量轉移 (FRET):

用於在活細胞中實時監測蛋白修飾。