單克隆抗體糖型分析的常用方法
單克隆抗體（mAbs）由單一的B淋巴細胞克隆產生，它們與特定的抗原有高度特異性的結合。除了蛋白質結構，單克隆抗體的糖鏈也對其功能、生物分佈、免疫原性和穩定性有重要影響。因此，對單克隆抗體的糖型進行分析是藥物開發中的一個關鍵步驟。
以下是常用的單克隆抗體糖型分析方法：
1.毛細管電泳-質譜聯用（CE-MS）：
這種方法特別適合於分析N-糖型。毛細管電泳用於分離糖型，而質譜用於結構鑑定。
2.液相色譜-質譜聯用（LC-MS）：
可以用於分析N-糖和O-糖。首先利用酶解或化學方法從抗體上釋放糖，然後使用液相色譜進行分離和質譜進行結構鑑定。
3.熒游標記和HPLC分析：
糖鏈首先被釋放並與熒游標籤反應，然後使用HPLC進行分離和定量。
4.糖凝集素結合測定（Lectin Blotting）：
使用特定的糖凝集素與特定糖結構結合，可以用於鑑定特定的糖型結構。
5.NMR（核磁共振）：
可以提供關於糖結構的詳細資訊，但需要較大的樣品量，並且技術要求較高。
6.酶聯免疫吸附試驗 (ELISA)：
使用特定的糖型結合蛋白或抗體來檢測和定量糖鏈。
每種技術都有其優勢和限制。選擇哪種方法通常取決於分析的目的、樣品的可用量、所需的靈敏度和解析度以及可用的儀器裝置。在藥物開發的不同階段，可能需要使用多種技術來全面評估產品的糖型異質性和一致性。
圖1
百泰派克生物科技--生物製品表徵，多組學生物質譜檢測優質服務商
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