Tau蛋白的泛素化鑑定流程
Tau蛋白是一種微管相關蛋白，主要存在於神經細胞中，並參與微管的穩定化。在某些神經退行性疾病，如阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）中，Tau蛋白可能會異常磷酸化和聚集，形成所謂的Tau團塊或神經纖維纏結。
泛素化是一種蛋白質的翻譯後修飾，涉及將一個或多個泛素分子連線到目標蛋白上。這種修飾通常會標記蛋白質進行降解，但也參與許多其他細胞過程。
圖1. 泛素化修飾研究路線
Tau蛋白的泛素化鑑定主要是爲了確定Tau蛋白是否被泛素化，以及在哪些位點上發生泛素化。以下是基本步驟：
1、樣品製備：
從相關的細胞或組織中提取Tau蛋白。
2、免疫沉澱：
使用針對Tau蛋白的抗體進行免疫沉澱，從樣品中富集Tau蛋白。
3、蛋白質電泳：
透過SDS-PAGE對沉澱的蛋白進行分離。
4、免疫印跡分析：
使用針對泛素的抗體進行免疫印跡（Western Blot）分析，檢測Tau蛋白是否被泛素化。
5、質譜分析：
爲了準確鑑定Tau蛋白上的泛素化位點，可以進一步進行質譜分析。
6、資料解析：
根據質譜資料解析Tau蛋白的泛素化位點。
Tau蛋白的泛素化與其在疾病中的聚集和降解機制可能相關，因此對其進行鑑定對於理解神經退行性疾病的分子機制是非常重要的。
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