蛋白的氨基酸序列測定
蛋白的氨基酸序列測定是指確定蛋白質分子中氨基酸的精確排列順序的過程。以下是關於氨基酸序列測定的基本介紹:
一、方法:
1、Edman 降解法:
由Pehr Edman於1950年代開發,它依次去除蛋白質的N-末端氨基酸並鑑定其身份。這種方法可以連續確定大約50個氨基酸的序列,但對於更長的蛋白質需要其他策略。
圖1
2、質譜法:
利用質譜儀來鑑定蛋白質或其裂解片段的質量,從而推斷氨基酸序列。質譜法用於蛋白質序列分析,較Edman降解法而言,其優點在於,質譜法更敏感,可以更快地裂解肽,可以識別末端封閉或修飾的蛋白質。
圖2
二、應用:
1、功能研究: 瞭解蛋白質的氨基酸序列可以幫助研究者預測蛋白質的功能和結構。
2、進化研究: 透過比較不同物種中的蛋白質序列,研究者可以瞭解物種間的親緣關係和進化模式。
3、疾病研究: 某些遺傳性疾病是由蛋白質序列的突變引起的,透過測定蛋白質序列可以診斷和研究這些疾病。
三、侷限性:
1、Edman 降解法對長序列的測定存在侷限性。
2、質譜法需要先進的儀器和複雜的資料分析。
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