Edman降解法：多肽氨基酸序列的經典測定方法
Edman降解法是一種用於確定多肽和蛋白質的氨基酸序列的經典方法。該方法是由Pehr Edman在20世紀50年代開發的，至今仍被廣泛使用，尤其是對於較短的多肽片段。
一、原理：
1.Edman降解基於連續地從多肽的N端移除氨基酸並對其進行識別的原理。
2.首先，多肽的N端與Edman試劑（酚異硫氰酸）反應，形成一個穩定的酯類化合物。
3.隨後，在弱酸條件下，這個酯類化合物會斷裂，釋放出與Edman試劑形成的衍生氨基酸。這個過程不會破壞多肽的其他部分。
4.釋放出的衍生氨基酸可以透過色譜法或其他方法進行鑑定。
5.重複上述過程，可以逐個識別多肽的氨基酸序列。
圖1
二、優點：
1.特異性：
Edman降解法非常特異，只針對N端的氨基酸。
2.準確性：
在理想情況下，該方法可以提供非常準確的測序結果。
三、限制：
1.長度限制：
儘管該方法是非常準確的，但通常只能用於較短的多肽片段，通常是50-60個氨基酸以內。對於更長的多肽或蛋白質，需要先進行切割，然後再分別測序。
2.敏感性：
需要足夠數量的樣品以確保測序的準確性。
四、應用：
雖然現代的質譜技術在蛋白質和多肽測序中已經變得非常流行，但Edman降解法仍然是一種有價值的工具，特別是當質譜方法不適用或需要驗證質譜結果時。
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