TMT技術在蛋白質組學中的應用與分析方法

TMT（Tandem Mass Tags）技術是蛋白質組學研究中用於蛋白質定量分析的一種先進方法。TMT標記涉及使用一系列重量不同的化學標籤，這些標籤可以結合到肽段的氨基末端和側鏈上。透過這種方法，可以同時處理多個樣本，然後將它們混合在一起進行質譜分析。TMT技術允許多達16個不同的樣品同時進行定量分析，使其成為蛋白質組學研究中的一個強大工具。這種技術的關鍵優勢在於其能夠提供高通量、高靈敏度和高準確性的蛋白質表達水平比較。TMT圖譜的特點和分析過程包括：

1.樣品標記：

TMT標記涉及將不同的化學標籤連線到樣品中的肽段上。每個標籤具有相同的質量和結構，但在重同位素的組成上略有不同，從而在質譜分析中產生不同的訊號。

2.樣品混合和色譜分離：

標記後的樣品被混合在一起，然後透過液相色譜（LC）分離。

3.質譜分析：

分離的肽段透過質譜儀進行分析。在質譜儀中，TMT標記的肽段首先產生前體離子訊號，然後在碰撞誘導解離（CID）或高能碰撞解離（HCD）下分裂，產生獨特的標記離子。

4.定量分析：

TMT標記產生的報告離子在質譜圖中用於定量分析。透過比較不同標籤的報告離子的強度，可以定量比較各個樣品中的蛋白質表達水平。

5.數據處理和生物資訊學：

數據處理包括對齊、峰識別、定量分析以及與蛋白質資料庫的匹配。

生物資訊學分析用於鑑定蛋白質、進行功能註釋和生物學通路分析。

基於TMT的蛋白質組學服務工作流程