質譜法N端序列分析

    質譜法N端序列分析是一種利用質譜技術高效、準確地測定蛋白質/多肽N端的氨基酸序列的方法。由於其高靈敏度、高解析度和高通量的優點,可用於分析複雜的蛋白質/多肽混合物,以及鑑定修飾、突變以及其他序列變異。與傳統的Edman降解法相比,質譜法具有更高的通量和靈敏度,能夠分析更復雜的樣品和較大的蛋白質。

     

    基於高分辨質譜法的N端測序,樣品經過SDS-PAGE分離目標蛋白後使用蛋白酶酶解,酶解後的產物用Q-Exactive系列質譜儀(Thermo Fisher Scientific)進行質譜分析,肽段在質譜中碎裂得到b、y離子的二級質譜圖,透過圖譜與蛋白理論氨基酸序列比對確定蛋白質的N端位置。百泰派克生物科技BTP結合高效液相色譜儀和高分辨質譜,基於N端測序原理,建立了基於質譜法的N端序列分析平臺,百泰派克生物科技透過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證;為您提供高質量的質譜法N端序列分析服務,我們採用兩種不同的蛋白酶切方式,產生兩個長度不同的N端肽段,相互驗證最終確定蛋白N端序列。歡迎免費諮詢,瞭解更多詳情!

     

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    質譜法N端序列分析兩種酶切方式對比

     

    實驗儀器

     

    • 高效液相色譜串聯質譜儀:高效液相色譜儀-Easy-nLC 1200
    • 電噴霧-組合型離子阱Orbitrap 質譜儀-Q Exactive™ Hybrid

     

    Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer

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    技術優勢

     

    • 基於高分辨質譜法的N端測序,可以透過高解析度質譜分析N端封閉和翻譯後修飾(PTMs),從而確定蛋白質N端起點;
    • 對於複雜的蛋白,我司支援對複雜蛋白進行N端二甲基化標記,透過分析標記位置確定複雜蛋白樣品中的多個蛋白的N端起點。

     

    案例示意

     

    蛋白藥物樣品的N端氨基酸序列分析:

    Trypsin酶解後的樣品經過LC-MS/MS分析後得到質譜資料,質譜資料經過與理論資料庫匹配,得到和理論N端序列(HYAHVDCPGHADYVK)相符合的MS2圖譜,圖譜如下:

     

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    N端序列二級質譜圖

     

    透過以上分析可以得出此蛋白藥物的N端起始氨基酸為組氨酸,N端序列為HYAHVDCPGHADYVK。

     

    中/英文專案報告

     

    在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:

    1. 實驗步驟(中英文)
    2. 相關的質譜引數(中英文)
    3. 質譜法N端序列分析詳細資訊
    4. 質譜圖片
    5. 原始資料

     

    質譜法N端序列分析一站式服務

     

    您只需下單-寄送樣品
    百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告

     

    相關服務

     

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