Edman降解法N端序列分析

N端序列與蛋白質的功能和穩定性息息相關，對蛋白質進行N端測序分析，可以確定蛋白質的起點，有利於幫助分析蛋白質的高階結構，揭示蛋白質的生物學功能。Edman降解法（Edman degradation）透過逐步移除蛋白質N端的氨基酸並識別其型別，以測定蛋白質或多肽N端氨基酸序列。Edman測序反應是一個迴圈過程，即在弱鹼性條件下使多肽/蛋白與異硫氰酸苯酯（PITC）反應，然後用酸處理，從多肽鏈上僅使氨基末端殘基以氨基酸的苯基乙內醯硫脲衍生物的形態遊離出來，然後對分離出的氨基酸進行鑑定，每一輪反應可鑑定一個氨基酸，如此迴圈，最後實現N末端氨基酸序列的鑑定。

Edman降解法N端序列分析示意圖

百泰派克生物科技BTP基於島津公司Edman測序系統建立了N端序列分析平臺，並透過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，為廣大科研工作者和科研客戶提供純化後蛋白產物、抗體、蛋白疫苗、重組膠原蛋白等的N端測序服務。採用我們的測序系統，可以測定N端30個氨基酸的序列資訊。採用特定的蛋白上樣系統，可以測定N端的60-70個氨基酸。歡迎免費諮詢，瞭解更多詳細資訊！

實驗儀器

全自動蛋白質/多肽測序儀（PPSQ33A）

技術優勢

透過跑膠轉膜或者點膜的方式進行樣品處理，可以直接分析氨基酸資訊，不需要任何蛋白質資料庫就可以準確分析N端氨基酸序列；
能準確辨別異亮氨酸和亮氨酸、谷氨醯胺和賴氨酸；
能準確識別和鑑定全長序列中混有的截斷體（N-1, N-2等）；
準確測定包含大量重複片段蛋白的序列。

案例示意

為對19種PTH-氨基酸進行校準，故先測試19種PTH氨基酸的混合標準品，校準測試混合標準品圖譜如下：

標準品校準測試圖譜

PTH氨基酸混合標準品校準測試完成後，測試樣品的N-端序列，樣品測試圖譜如下：

N端第1位

N端第2位

N端第3位

透過上述圖譜可以確定蛋白質N端序列為Tyr-Val-Trp。

中/英文專案報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：

1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜引數（中英文）
3. Edman降解法N端序列分析詳細資訊
4. 質譜圖片
5. 原始資料