高通量基因敲除服務
- 傳統基因敲除技術:通量低，通常2-3個月完成幾十個敲除細胞系的構建；
- 高通量基因敲除技術:通量高，通常1-2個月即可獲得幾百個敲除細胞系的構建。
- 傳統基因敲除技術:敲除效率在30-90%左右，且不均一；
- 高通量基因敲除技術:敲除效率很高，可達70-100%。
- 傳統基因敲除技術:KO細胞儲備不足3000+；
- 高通量基因敲除技術:人類全基因組覆蓋，KO細胞儲備高達19000+。
“敲除”相關哺乳動物基因是研究基因功能或其作為藥物靶點潛力的一種重要方法，在阿爾茨海默病、癌症、心血管疾病、炎症或代謝疾病等神經退行性疾病研究中都被廣泛應用。CRISPR/Cas9是一種革命性的基因編輯技術，可以精確修改基因組序列。CRISPR是細菌和古細菌中的一種免疫系統，能夠識別並切割入侵病毒的基因組。透過引入Cas9蛋白和相應的嚮導RNA，CRISPR/Cas9技術可以精確定位和切割特定的DNA序列，實現基因敲除、點突變和基因插入。CRISPR/Cas9介導的基因編輯具有巨大的臨床應用潛力，隨著該技術的日趨成熟，其在藥物靶點發現和驗證、基因功能研究、基因治療、癌症免疫療法等眾多領域發揮著越來越重要的作用。
Neil, C.; et al. ACS Synthetic Biology. 2022.
CRISPR/Cas9基因敲除技術
為滿足基礎研究及醫藥研發的需求，科研領域急需獲得系列靶基因/全基因組的敲除細胞。百泰派克生物科技（BTP）採用最佳化的CRISPR/Cas9系統為您提供高通量基因敲除服務，我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫覆蓋了完整的人類全基因組，全基因組陣列敲除庫已在人原代細胞全部完成高內涵篩選的驗證，超過80%以上的靶點達到70%以上的敲除效率。
BTP致力於為您提供最簡單易用的高通量CRISPR基因敲除服務，包括病毒包裝、質粒製備、Cas9濃度測試等，為您解決選擇哪個細胞進行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關鍵問題。可進行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。您只需提供基因名和目標細胞，百泰派克生物科技負責所有專案後續，包括專案評估（靶基因是否在目標細胞中表達、是否是必需基因）、KO實驗、KO細胞驗證、凍存KO細胞和活KO細胞交付。
服務優勢
1.樣本適用性強
適用於人、小鼠的細胞系，原代細胞，免疫細胞及iPS細胞等。
2.基因必要性及表達量分析
在進行基因敲除實驗前，我們會基於生物資訊學和蛋白質組學資料對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析，確保實驗的可行性，降低實驗風險。
3.gRNA無需從頭設計和驗證
我們完成了人類全基因組gRNA的全部驗證，與藥物相關的靶點也完成了PCR測序驗證，無需針對客戶的靶點設計預實驗進行gRNA驗證，大大縮短了專案週期。
4.高通量高效率
我們採用最佳化的CRISPR/Cas9系統進行高通量基因敲除，多個sgRNA/靶基因設計保證高敲除效率，超過80%靶點敲除效率在70%以上，短期內（10天內）即可提供高敲除效率的KO pool，滿足絕大多數的應用場景。
5.敲除效率雙驗證
基因敲除後，我們採用WB實驗中抗體KO驗證的首選方法——Sanger測序和深度蛋白質組學技術對敲除效率進行雙驗證，資料真實性的雙重保障。
應用案例
1.基因治療
Dever DP, et al. Nature. 2016.
2.免疫細胞工程
Roth TL, et al. Nature. 2018.
3.基因功能研究
Gordon DE, et al. Science. 2020.
4.藥物靶點篩選
Morgens DW, et al. Nat Biotechnol. 2016.
常見問題：
問題1.高通量基因敲除技術對比傳統基因敲除技術有哪些優勢？
回答：高通量基因敲除技術相比傳統基因敲除技術如慢病毒包裝法和質粒法等有以下優勢:
1）編輯通量
2）編輯效率
3）KO細胞儲量
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