2D Blue Native/SDS-PAGE複合物分析服務

    在生物膜中,許多蛋白質以複合物形式組成。百泰派克生物科技可利用2D Blue Native/SDS-PAGE對這些蛋白質複合物的亞基進行全域性分析。2D BN/SDS-PAGE分析中,樣品透過藍色native聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進行一維分離,然後透過SDS-PAGE進行二維分離。

    2D Blue Native SDS-PAGE複合物分析服務

    2D Blue Native SDS-PAGE複合物分析服務

    蛋白質複合物在時間和空間的所有複雜層面上都可以組織並維持細胞和細胞器的功能,包括細胞發育和分裂、轉錄和翻譯、呼吸作用和光合作用、轉運和代謝。蛋白質複合物可能表現出部分和暫時性變化,並且表現出不同的穩定性,使鑑定和分析難以順利進行。BN-PAGE是用於蛋白質複合物高解析度分離的技術。BN-PAGE可用於確定蛋白質複合物的大小、相對丰度和亞基組成分析。

    在2D BN-PAGE分析中,蛋白質或蛋白質複合物樣品在自然條件下在1D BN-PAGE中分離,考馬斯亮藍染料帶有負電荷,與所有蛋白質非特異性結合。考馬斯亮藍不作為洗滌劑使用,從而保留了蛋白質複合物的結構。另外,考馬斯亮藍的結合降低了電泳過程中蛋白質聚集的趨勢。因此,樣品的電泳遷移率取決於結合的考馬斯亮藍的負電荷以及複合物的大小和形狀。透過BN-PAGE分離後,蛋白質和蛋白質複合物樣品在凝膠中透過SDS變性,然後再進行2D SDS-PAGE凝膠電泳分離。

    BN-PAGE和SDS-PAGE的結合,因為一維中的梯度凝膠和二維中的線性凝膠,單體蛋白質將以雙曲線對角線遷移,而蛋白質複合物的組成成分位於該對角線以下。代表同一蛋白質複合物亞基的蛋白質可以在二維的一條垂直線中找到,而同一蛋白質在水平線中的多個斑點表明該蛋白質同時存在於幾種不同的蛋白質複合物中。
    2D BN/SDS-PAGE分析可以提供有關樣品的大小、數量、蛋白質組成、化學計量和相對丰度的資訊,是研究蛋白質複合物的有用工具。

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