什麼是TMT等壓標記?

TMT（Tandem Mass Tag）等壓標記是一種質譜學技術，用於在蛋白質組學研究中定量分析蛋白質的相對丰度。TMT標記方法利用了特殊的同位素標籤試劑，它們具有相同的質量，但在碎裂時產生不同的碎片離子。透過這種方法，可以同時比較多個樣本中蛋白質的丰度變化。




TMT等壓標記的過程分為以下幾個步驟：




1.蛋白質提取：

首先從不同的生物樣本中提取蛋白質。




2.蛋白質酶解：

將提取的蛋白質用酶（如胰蛋白酶）水解成肽段。




3.標記：

將每個樣本的肽段與特定的TMT標籤試劑反應。每個試劑都具有相同的質量，但在碎裂時產生不同的報告離子。




4.混合：

將標記後的肽段樣品混合在一起。




5.質譜分析：

使用液相色譜串聯質譜儀（LC-MS/MS）對混合肽段進行分析。質譜儀可以檢測到肽段的質量和碎片離子，其中包括報告離子。




6.資料分析：

透過比較報告離子的強度，可以定量地分析不同樣本中蛋白質的相對丰度。




TMT等壓標記技術具有許多優點，如高度靈敏、高通量、可同時分析多個樣本等。然而，這種方法也存在一些侷限性，如可能受到同位素雜質干擾、需要對資料進行復雜的處理和分析等。儘管如此，TMT等壓標記仍然是蛋白質組學研究中一個重要的定量分析方法。




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