當ph大於蛋白質的等電點的時候，蛋白質不應該帶負電嗎？這個時候用質譜負模式為什麼檢測不到？

是的，當pH大於蛋白質的等電點（pI）時，蛋白質會帶負電。這是因為在這種條件下，蛋白質中帶正電的氨基酸殘基（如賴氨酸、精氨酸和組氨酸）的質子會丟失，而帶負電的氨基酸殘基（如天冬氨酸和穀氨酸）的負電荷保持不變。結果是，整個蛋白質帶有負電荷。




然而，在質譜分析中，負模式很少用於蛋白質檢測，原因如下：




1.電噴霧離子化（ESI）：

在蛋白質質譜分析中，最常用的離子化方法是電噴霧離子化（ESI）。ESI在正模式下的效果通常比負模式下更好，因為正模式下更容易產生多質子化的蛋白質離子。這些多質子化的離子具有較低的質量/電荷比，便於質量分析器進行檢測。




2.碎片化效率：

對於負模式，碎片化效率通常較低。這意味著在負模式下，產生足夠的資訊以識別蛋白質序列的肽段碎片較為困難。而在正模式下，碎片化效率更高，產生更多的有用資訊。




3.離子源和質量分析器的相容性：

許多質譜儀器的離子源和質量分析器在正模式下的效能更好。負模式下可能需要改變儀器引數，例如離子源電壓和氣體流速，這可能導致靈敏度降低或訊號失真。




因此，儘管蛋白質在高於等電點的pH條件下帶有負電荷，但在質譜分析中，通常使用正模式來檢測蛋白質，因為正模式具有更高的靈敏度和碎片化效率。




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