SDS-PAGE蛋白質純度分析：請問怎麼分析純度啊

SDS-PAGE（Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳）是一種常用的蛋白質分析方法，透過比較蛋白質的相對遷移距離，可以對蛋白質的大小進行分析。透過觀察凝膠上的條帶數量和強度，可以大致評估蛋白純度。利用SDS-PAGE評估蛋白質純度的基本步驟如下：

1.聚丙烯醯胺凝膠製備：

製備適當濃度的聚丙烯醯胺凝膠，濃度通常根據蛋白質大小選定。對於大多數應用來說，8-15%的濃度適用於大多數蛋白質。對於更高解析度的應用，可以使用梯度凝膠。

2.加樣：

將處理過的蛋白樣品裝載到凝膠的樣品孔中。同時，也要裝載一個分子量標準（分子量對照），以便後續分析蛋白質大小。

3.電泳：

在一定的電壓下進行電泳，使蛋白質在凝膠中沿著電場方向遷移。電泳時間取決於凝膠濃度、電壓和蛋白質大小。

4.染色和脫色：

電泳完成後，將凝膠染色，通常使用考馬斯亮藍或銀染等方法。然後進行脫色處理，去除多餘的染料，以便觀察到清晰的蛋白條帶。

5.結果分析：

觀察凝膠上的蛋白條帶，評估蛋白純度。理想情況下，純蛋白應該只出現一個明顯的條帶。如果有多個條帶，說明蛋白存在雜質，可以使用影象分析軟體對條帶的強度進行定量分析，以評估目標蛋白的純度。

需要注意的是，SDS-PAGE分析的純度計算只是一種定性或半定量方法，用於快速評估蛋白質樣品的純度。對於更精確的純度評估，可以考慮使用高效液相色譜（HPLC）等方法。

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