現有一份生物樣品,請設計試驗獲取該生物樣品中的蛋白質種類與含量。怎麼設計呢?

    要獲取生物樣品中的蛋白質種類與含量,可以採用以下步驟設計實驗:


    一、樣品預處理:


    1.將生物樣品進行適當的處理,以提取其中的蛋白質。常用的方法包括機械破碎、超聲波破碎、酶解等。處理後,將樣品進行離心,以去除細胞碎片和其他雜質。


    2.將處理後的生物樣品進行蛋白質提取。可以使用酸沉澱、鹽沉澱、有機溶劑沉澱等方法提取蛋白質。提取過程中,需要注意控制條件以避免蛋白質降解。


    二、蛋白質分離純化:


    1.使用SDS-PAGE(聚丙烯醯胺凝膠電泳)對蛋白質樣品進行分離,以獲得不同分子量的蛋白質條帶。


    2.對分離得到的蛋白質進行染色(如考馬斯亮藍染色)並記錄結果。


    三、蛋白質種類鑑定:


    1.將SDS-PAGE分離得到的蛋白質條帶切下並進行膠內消化,釋放出多肽。


    2.使用液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)對多肽進行分離與分析。


    3.透過生物資訊學軟體(如Mascot、Sequest等)與已知蛋白質資料庫進行比對,以鑑定蛋白質種類。


    四、蛋白質定量鑑定:


    1.根據LC-MS/MS分析結果,選取特定的蛋白質靶標肽段。


    2.使用多反應監測(Multiple Reaction Monitoring, MRM)或全內標定量方法(如透過同位素標記的標準肽段),對生物樣品中的蛋白質進行定量分析。


    3.透過定量結果計算每種蛋白質在生物樣品中的含量。


    透過以上實驗步驟,可以獲取生物樣品中的蛋白質種類與含量。具體實驗條件和方法可能因實驗目的和樣品型別而有所不同,需要根據實際情況進行調整。


    百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢測優質服務商


    相關服務:

    蛋白組學

    蛋白質質譜鑑定

    蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定

    Shotgun鳥槍法蛋白質鑑定

    分子量測定

    蛋白質結構鑑定

    定量蛋白組分析

    基於Label Free的定量蛋白組分析

    基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT, SILAC

    蛋白質純度和均一性表徵

    SDS-PAGE蛋白質純度分析

提交需求
姓名 *
聯絡型別 *
聯繫方式 *
專案描述
諮詢專案 *

 

How to order?


/assets/images/icon/icon-rc2.png

客服諮詢

/assets/images/icon/icon-message.png

提交需求

https://file.biotech-pack.com/static/btpk/assets/images/icon/icon-wx-2.png

https://file.biotech-pack.com/pro/bt-btpk/image/config/config/20240322-4149-企业微信销售二维码.jpg

聯絡銷售人員

/assets/images/icon/icon-tag-sale.png

促銷活動

/assets/images/icon/icon-return.png