自制抗體做WB，跑重組蛋白有目的條帶，跑組織就沒目的條帶，這是怎麼回事呀？
在使用自制抗體進行Western Blot實驗時，如果跑重組蛋白時有目標條帶，而在跑組織時沒有目標條帶，可能有以下幾個原因：
1.組織中目標蛋白表達量低：
組織樣本中目標蛋白的表達量可能較低，低於檢測限。這種情況下，可以嘗試提高組織蛋白質樣本的濃度或最佳化實驗條件來提高檢測靈敏度。
2.組織製備不充分：
可能是因為組織提取過程不夠充分，導致目標蛋白沒有被完全提取。可以最佳化組織提取方法，確保目標蛋白被有效提取。
3.抗體特異性：
自制抗體在識別重組蛋白時可能表現出較高的特異性，而在組織樣本中，可能由於其他蛋白質的干擾，導致抗體識別受到影響。可以嘗試改進抗體的純化和親和性，以提高抗體的特異性。
4.抗體濃度不適當：
使用的抗體濃度可能不適合組織樣本。可以嘗試最佳化抗體濃度，以獲得更好的檢測效果。
5.組織樣品中蛋白質降解：
組織樣本中的蛋白質可能在處理過程中發生降解。確保在組織處理過程中加入蛋白酶抑制劑，並迅速進行組織破碎和離心，以減少蛋白質降解的可能性。
6.實驗操作差異：
在不同的實驗操作過程中，可能存在一定的差異。確保實驗操作的一致性，以便在不同實驗條件下獲得可靠的結果。
要解決這個問題，首先需要最佳化實驗條件，例如提高組織蛋白質樣本的濃度、改進抗體純化和親和性、最佳化抗體濃度和檢測靈敏度。同時，確保實驗操作的一致性和組織樣品的完整性。
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