生物大分子層析（親和、離子交換）色譜的色譜柱怎麼算上樣量？載量？

在生物大分子層析色譜中，親和色譜（Affinity Chromatography）和離子交換色譜（Ion Exchange Chromatography）是常用的分離方法。爲了獲得理想的分離效果，需要正確計算色譜柱的上樣量和載量。




1.上樣量（Sample Load）：

上樣量是指可以載入到色譜柱上的樣品總量。上樣量的計算通常需要根據色譜柱的體積和樣品的濃度來確定。爲了獲得良好的分離效果，上樣量應保持在適當的範圍內。過大的上樣量可能導致色譜柱飽和，從而降低分離效果。




計算方法：上樣量 = 色譜柱體積 × 樣品濃度 × 上樣體積係數




上樣體積係數通常由柱子供應商提供，或者可以透過實驗確定。




2.載量（Binding Capacity）：

載量是指色譜柱能夠結合的目標分子的最大量。載量的大小受到色譜柱的填料種類、顆粒大小、孔徑和官能團密度等因素的影響。在實際操作中，爲了確保良好的分離效果，上樣量應小於柱子的載量。




計算方法：載量 = 色譜柱體積 × 結合能力




結合能力是指柱子填料每單位體積能夠結合的目標分子量。結合能力通常由柱子供應商提供，或者可以透過實驗確定。




在生物大分子層析色譜實驗中，合適的上樣量和載量對於獲得高解析度和高回收率的分離至關重要。可以根據色譜柱的引數和樣品的特性，透過計算和實驗最佳化，找到合適的上樣量和載量，以提高色譜分離的效果。




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