樣品中有鹽,上質譜該怎麼辦?
樣品中的鹽可能會干擾質譜分析,影響結果的準確性。如果樣品中含有鹽,可以採取以下方法進行處理:
1.脫鹽處理:
使用脫鹽柱(如PD-10脫鹽柱)或者脫鹽離心管(如Zeba Spin脫鹽柱)將樣品中的鹽去除。這些方法透過凝膠過濾將大分子蛋白與小分子鹽離子分離,從而達到去除鹽的目的。
2.沉澱法:
使用酒精沉澱、氯仿甲醇沉澱等方法將蛋白沉澱下來,然後用去離子水或者鹽濃度較低的緩衝液重懸。這可以在一定程度上降低樣品中的鹽含量。
3.逆相色譜法:
採用高效液相色譜(HPLC)進行蛋白的分離與純化。逆相色譜法可以有效地去除樣品中的鹽分,並對蛋白進行純化。這種方法適用於具有高度選擇性和解析度要求的樣品處理。
4.離子交換色譜法:
透過離子交換色譜法,可以利用蛋白與離子交換樹脂間的靜電作用來分離蛋白和鹽。這種方法既可以降低樣品中的鹽含量,也可以對蛋白進行純化。
5.拔針法:
在質譜前處理過程中,可以採用拔針法(ZipTip)對樣品進行去鹽。拔針法是一種便捷、快速的微量樣品處理方法,透過小型逆相色譜柱進行去鹽和濃縮。
在處理含鹽樣品時,可以根據樣品特性、實驗條件和實驗需求選擇合適的去鹽方法。去除樣品中的鹽分有助於提高質譜分析的準確性和可靠性。
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