蛋白分析FAQ彙總
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• 什麼是凝膠色譜分離純化技術? 論述該色譜分離技術的主要應用?
凝膠色譜分離純化技術,又稱為凝膠滲透色譜(Gel Permeation Chromatography, GPC)或分子篩選色譜(Size Exclusion Chromatography, SEC),是一種基於分子大小和形狀來分離純化化合物的液相色譜技術。在這個過程中,樣品被
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質譜檢測是一種透過分析樣品分子的質量-電荷比(m/z)來鑑定和定量分析樣品中化學成分的方法。其基本原理是將樣品分子離子化,然後對離子進行加速、分離和檢測,最終得到離子的質量-電荷比資訊,透過對離子質譜圖的解析可以確定化合物的分子結構、分子量以及含量等。 下面是初學者進行
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多肽液相色譜(Peptide Liquid Chromatography,簡稱LC)是一種常用於生物分析領域的分離和純化方法,尤其在蛋白質和多肽領域應用廣泛。與其他色譜技術相比,多肽液相色譜具有以下優勢: 1.高解析度:液相色譜技術具有較高的解析度,能夠有效分離結構相似
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膠內酶切後進行質譜定量的方法在蛋白質組學研究中得到了廣泛應用。以下是一些關於這個方法的經典和相關文獻,以供您參考: 1.Shevchenko, A., Tomas, H., Havlis, J., Olsen, J. V., & Mann, M. (2006). In-gel dige
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從蛋白質的氨基酸序列中,可以獲取許多關於其結構和功能的資訊。以下是從蛋白質序列中可以推測的一些結構特徵: 1.主要二級結構:透過分析蛋白質序列中的氨基酸,可以預測蛋白質的主要二級結構元件,如α-螺旋、β-摺疊和無規則捲曲結構。一些軟體和演算法(例如DSSP、PSIPRE
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泛素化是一種翻譯後修飾過程,透過將泛素(Ubiquitin)結合到蛋白質上,調控蛋白質的降解、訊號傳導和其他功能。目前常用的檢測泛素化蛋白的方法主要有: 1.免疫印跡(Western Blot): 首先對細胞或組織樣本進行蛋白質提取,然後透過SDS-PAGE進行蛋白
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在單個細胞水平上進行蛋白質組學研究是一項挑戰性的工作,因為細胞內蛋白質的數量和複雜性較高,而單細胞的蛋白質總量相對較低。然而,隨著科學技術的發展,研究人員已經發展了一些方法和技術,使單細胞蛋白質組學研究成為可能。單細胞蛋白質組學分析的一般流程如下: 1.單細胞分離:首先
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一般來說,western blot電泳液不應該重複使用。這是因為western blot電泳液中的成分(如Tris緩衝液、SDS、甲醛等)可能會因為使用後的蛋白質殘留物、細胞殘留物和其他雜質而失去活性,從而影響實驗結果的準確性。 此外,使用過的電泳液可能會被汙染,導致重
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液相色譜(HPLC,High-Performance Liquid Chromatography)是一種高效、精準的分離和定量分析技術,廣泛應用於化學、製藥、食品、環保、生物醫學等領域。下面是液相色譜分析的基本步驟: 1.樣品製備:首先需要對待測樣品進行適當的前處理,如
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• 磷酸化蛋白質組學中蛋白的表達量是和磷酸化水平相關?還是活性相關?
磷酸化蛋白質組學(Phosphoproteomics)是一種研究蛋白質磷酸化修飾的方法,它可以幫助研究者瞭解細胞訊號傳導、調控和蛋白質功能。在磷酸化蛋白質組學中,蛋白質的表達量通常指的是蛋白質的總量,而磷酸化水平是指蛋白質分子中磷酸化位點的佔比。蛋白質的活性則是指蛋白質在生物
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