蛋白分析FAQ彙總

• • 蛋白組學的樣本包括哪些？

  蛋白組學研究中的樣本型別多種多樣，包括細胞、組織、體液（如血液、尿液、腦脊液等）、微生物、動植物組織、環境樣本（如土壤、水、空氣等）等。針對不同的樣本型別，製備方法和要求也有所不同： 細胞樣本製備： 1.收集細胞：首先收集培養的細胞，進行洗滌去除培養基中的血清蛋白等

• • 液相測試對峰的高度有要求嗎？

  在液相色譜（Liquid Chromatography, LC）中，色譜峰的高度是一個重要的引數，可以提供關於待測化合物的定量資訊。峰高與待測化合物的濃度成正比，因此可以用於濃度的計算。然而，對於峰高並沒有絕對的要求，而是需要滿足以下條件，以確保準確、可靠的分析結果：

• • Western blot（WB）實驗中，檢測的純化蛋白染色可見條帶但顯影無條帶，除了操作試劑方面還可能是什麼原因？

  在Western blot（WB）實驗中，如果檢測的純化蛋白染色可見條帶但顯影無條帶，排除操作和試劑原因後，可能存在以下幾種情況： 1.抗體特異性不足：使用的一抗或二抗可能對目標蛋白的特異性不夠高，導致無法識別目標蛋白。嘗試更換抗體或使用其他驗證過的抗體。 2.抗

• • 關於蛋白質組如何計算表達水平?

  在蛋白質組學研究中，衡量蛋白質表達水平的常用方法是基於質譜資料的相對或絕對定量。常見的定量方法包括標記法和非標記法： 1.標記法定量：使用同位素標籤技術對蛋白質或肽段進行標記。常見的標籤法有如同位素標記（如SILAC， ICAT， TMT， iTRAQ等）。透過比較不同

• • 為什麼離子交換色譜在離子分析時 流動相中的酸鹼離子對組分電導檢測無影響？

  離子交換色譜（Ion Exchange Chromatography，簡稱IEC）是一種分離和分析離子的技術。在離子交換色譜中，通常採用電導檢測器（Conductivity Detector）來檢測流動相中離子的濃度。在某些實驗條件下，流動相中的酸鹼離子對組分電導檢測無明顯影

• • 氣相色譜串聯質譜的進樣口溫度最高可以設定多少?

  氣相色譜串聯質譜（GC-MS/MS）的進樣口溫度通常取決於色譜儀的設計和製造商的建議。不同型號的氣相色譜儀器的進樣口溫度範圍可能有所不同。 通常，進樣口溫度可以設定在範圍內，大多數裝置允許將溫度設定在40℃至350℃之間。然而，有些高效能的氣相色譜儀器的進樣口溫度最高可

• • 質譜為什麼只有MRM方法才能實現準確的定量？

  首先，我們需要明確SIM（Selected Ion Monitoring，選擇離子監測）、SRM（Selected Reaction Monitoring，選擇反應監測）和MRM（Multiple Reaction Monitoring，多反應監測）三者之間的關係。事實上，S

• • 質譜結果中，為什麼我的有很多角蛋白呢？

  在質譜結果中出現大量角蛋白（Keratins）可能是因為實驗過程中發生了樣品汙染。角蛋白是一類豐富的結構蛋白，廣泛存在於人體和動物體內的表皮、毛髮、指甲等組織。由於角蛋白的丰度高和穩定性強，它們很容易在實驗過程中汙染樣品，導致質譜結果中出現大量角蛋白。 實驗室中角蛋白汙染的主要來源包括

• • 生物化學實驗中，對大鼠組織進行蛋白質組學和代謝組學以後，下面該進行哪一步？

  在生物化學實驗中，完成大鼠組織的蛋白質組學和代謝組學分析後，下一步通常是進行資料分析。以下是可能的步驟： 1.資料預處理：對原始資料進行預處理，如去除噪聲、背景校正、歸一化等，以減少實驗誤差和技術偏差的影響。 2.資料分析：透過統計學方法和機器學習演算法對資料進行

• • 研發了一個固相微萃取儀器，可以實現自動進樣，把樣品分成三個組分想問一下如果進行接質譜定量，研究思路是?

  固相微萃取（SPME）是一種樣品前處理技術，透過將固相微萃取纖維暴露在樣品中，使待測組分吸附在纖維上。SPME與質譜（MS）結合使用可以實現高靈敏度、高選擇性的定量分析。 在實現自動進樣的固相微萃取儀器下，將樣品分成三個組分進行接質譜定量的研究思路可以按照以下步驟進行：